什么是Tm值,简述影响Tm值大小的因素。
通常把加热变性使DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度,用Tm值表示。
影响DNA Tm大小的因素:
1)DNA的均一性:均质DNA的Tm值一般在较小的温度范围内;异质DNATm值在较宽的温度范围内,所以Tm值可作为DNA均一性的标准。
2)G—C的含量:G—C的含量越高,Tm值越高,成正比。
3)介质中的离子强度:一般,在离子强度较低的介质中,Tm值较低,变性温度的范围较宽;在较高离子强度的介质中,Tm值较高,熔解发生在一个较小的温度范围内。
