简述实时荧光定量PCR中分子信标技术的原理
分子信标实际上是一段荧光素标记的寡核苷酸，由于序列的特殊性使其结构由环状区 (15〜30个核苷酸）和柄区（5〜8BP)组成,5^末端标记荧光报告基团，Y末端标记荧光淬灭 基团。当无目的序列存在时，分子信标的结构呈茎环结构，此时由于两端的基团相距非常 接近，即可发生FRET;荧光报告基团发出的荧光被淬灭基团吸收并以热的形式散发，此时 没有荧光信号，因而荧光本底极低。当有目的序列存在时，分子信标与靶序列特异性结合， 环状区单链与靶序列杂交而形成稳定的、比柄区更长的双链，分子信标的构型发生变化，从 而使荧光基团与淬灭基团分开，此时荧光基团发射荧光不能被淬灭，可检测到荧光。由于 荧光信号的强度随反应产物的增加而增加，因此可以对靶片段进行定量。
