简述免疫印迹法的基本原理。
免疫印迹法亦被称为Western blot,是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来的一项检测蛋白质技术。它将SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨力与抗原抗体反应的特异性结合。典型的印迹实验包括三个步骤:①蛋白质的电泳分离;②将电泳后凝胶上的蛋白质转移至固体膜上,用非特异性、非反应活性分子封闭固体膜上未吸附蛋白质的区域;③免疫学检测。免疫印迹克服了聚丙烯酰胺凝胶电泳后直接在凝胶上进行免疫学分析的弊端,极大地提高了其利用率、分辨率和灵敏度,使其成为使用最广泛的免疫化学之一。
