试从工作原理分析数字PCR技术与荧光定量PCR技术的区别。
数字PCR基本原理是将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中,在每个反应器中包含或不包含一个目标分子( DNA模板) ,实现“单分子模板PCR扩增”,扩增结束后,通过阳性反应器的数目“数出”目标序列的拷贝数。荧光定量PCR技术基本原理是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实现实时监测整个PCR进程,获得描述PCR过程的动力学曲线,对目的基因起始模板进行定量分析的PCR技术。两者区别:①数字PCR不依赖于CT值,因此不受扩增效率的影响,扩增结束后通过直接计数或泊 松分布公式来计算每个反应单元的平均浓度(含量),能够将误差控制在5%以内;②数字 PCR可以不需要对照标准样本标准曲线来实现绝对定量分析。