简述ELISA双抗体夹心法的操作步骤。

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简述ELISA双抗体夹心法的操作步骤。


ELISA双抗体夹心法的主要操作步骤如下:( 1)特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。( 2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。( 3)加酶抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量呈正相关。( 4)加底物:夹心复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。

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