试述食品中大肠菌群检验的方法与步骤。
(1)发酵试验:将待检样品10倍稀释后,取1mL及0.1mL各3份.分别菌种乳糖胆盐发酵管各3管,置36℃±1℃培养24 h±2h,如所有发酵管均不产气,可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,分别进行分离培养。 (2)分离培养将产气的发酵管分别转接在伊红—美蓝琼脂平板上,36℃±1℃培养18- 24h后观察菌落形态并进行革蓝氏染色和证实实验。 (3)证实实验:挑取上述平板上呈黑色并带有金属光泽的菌落1~2个进行革蓝氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36℃±1℃培养24 h±2h观察产气情况,凡乳糖管产气,革蓝氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。 (4) 报告:根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL/g大肠菌群的可能数。