简述紫外—可见光光度分析方法
(一)特点1.具有较高的灵敏度2.有一定的准确度3.操作简便、快速、选择性好、仪器设备简单4.应用广泛
(二)基本原理1.物质对光的选择性吸收2.光的吸收定律朗伯—比耳定律
(三)紫外—可见分光光度计
1.仪器的构成
分光光度计一般由光源、单色器、比色池、检测器和指示器五部分组成。
2.常见分光光度计722型分光光度计TU—1900型紫外—可见分光光度计
3.应用分光光度法应注意的问题
(1)比耳定律是一个只适用于稀溶液的定律,当浓度大到一定程度时,溶液中溶质的电离或聚合会发生一定程度的变化,从而导致对比耳定律的偏离。(2)溶液的pH(3)显色剂量(4)时间(5)温度(6)加试剂的次序(7)稳定性(8)掩蔽
(四)定性与定量
1.定性方法利用紫外及可见分光光度法对化合物进行定性分析时,需将待测试样和标准品用相同的溶剂配成浓度相近的溶液,将一系列不同波长的单色光,照射到含待测组分的溶液,可测得相应的—系列吸光度。2.定量方法(1)标准曲线法(2)直接比较法